Jak skomplikowane są testy na ojcostwo?
Od strony klienta wykonanie badania ojcostwa przebiega w bardzo prosty sposób. Zainteresowany badaniem otrzymuje z laboratorium zestaw do samodzielnego pobrania wymazu z policzka, pobiera materiał i następnie odsyła go z powrotem do laboratorium.
Mogłoby się wydawać, że zlecenie testu ojcostwa jest bardzo proste. Tak, rzeczywiście samo zlecenie badania nie jest skomplikowaną czynnością, ale już wykonanie badania genetycznego to złożony proces wymagający odpowiedniego sprzętu, specjalistycznych odczynników jak również wykwalifikowanego zespołu badawczego.
Źródłem DNA są wszystkie komórki posiadające jądra komórkowe. To właśnie dlatego w badaniu ojcostwa można wykorzystać różne materiały nie tylko wymaz z policzka lub krew, ale także włosy z cebulkami, chusteczki do nosa, plamy nasienia, maszynka do golenia lub szczoteczki do zębów.
Pierwszy etap analizy- izolacja DNA
Pobrany materiał jest trawiony specjalnymi odczynnikami po to aby naruszyć błony komórkowe i następnie wyizolować DNA w czystej postaci. Na tym etapie stosuje się szereg enzymów trawiących, próbki poddaje się i wirowaniu a następnie oczyszczaniu. Tak wyizolowane DNA może być wykorzystane do następnego etapu lub zamrożone w bardzo niskiej temperaturze.
Drugi etap analizy- reakcja PCR
Po izolacji uzyskuje się bardzo małe ilości DNA, niewystarczającego do przeprowadzenia dalszej reakcji. Dlatego na tym etapie wykorzystuje się reakcję PCR, które pozwala zwielokrotnić uzyskane w izolacji DNA. Reakcja PCR zrewolucjonizowała diagnostykę genetyczną. Zasada reakcji PCR opiera się na wielokrotnym ogrzaniu i oziębieniu próbki DNA, do której dodaje się organiczne związki chemiczne, primery (startery, które rozpoznają fragmenty DNA) oraz enzym – polimerazę DNA. Cały proces prowadzony jest w urządzeniu nazywanym termocyklerem.
Trzeci etap badania- sekwencjonowanie
Sekwencjonowanie polega na ustaleniu kolejności par zasad w wybranych regionach DNA. Proces ten jest całkowicie zautomatyzowany wymaga jedynie wysokiej klasy aparatury (sekwenatorów) oraz namnożonego DNA. W wyniku tego procesu uzyskuje się profile genetyczne danych osób.
Każdy z nas posiada swój unikatowy profil genetyczny, który dość często nazywany jest „genetycznym odciskiem palca”.
Czwarty etap- analiza statystyczna
Na końcu badania ojcostwa wykonuje się analizę statystyczną porównywanych ze sobą profilów genetycznych. Wykorzystuje się w tym celu specjalny program komputerowy dokonujący analizy prawdopodobieństwa. Ostatecznie laboratorium uzyskuje jednoznaczny wynik badania ojcostwa – potwierdzenie ojcostwa z prawdopodobieństwem 99,999% lub też jego wykluczenie ze 100% pewnością.
Autor:Barbara Prokurat
testDNA Laboratorium Sp. z o.o.
Ustalenie ojcostwa
Mogłoby się wydawać, że zlecenie testu ojcostwa jest bardzo proste. Tak, rzeczywiście samo zlecenie badania nie jest skomplikowaną czynnością, ale już wykonanie badania genetycznego to złożony proces wymagający odpowiedniego sprzętu, specjalistycznych odczynników jak również wykwalifikowanego zespołu badawczego.
Źródłem DNA są wszystkie komórki posiadające jądra komórkowe. To właśnie dlatego w badaniu ojcostwa można wykorzystać różne materiały nie tylko wymaz z policzka lub krew, ale także włosy z cebulkami, chusteczki do nosa, plamy nasienia, maszynka do golenia lub szczoteczki do zębów.
Pierwszy etap analizy- izolacja DNA
Pobrany materiał jest trawiony specjalnymi odczynnikami po to aby naruszyć błony komórkowe i następnie wyizolować DNA w czystej postaci. Na tym etapie stosuje się szereg enzymów trawiących, próbki poddaje się i wirowaniu a następnie oczyszczaniu. Tak wyizolowane DNA może być wykorzystane do następnego etapu lub zamrożone w bardzo niskiej temperaturze.
Drugi etap analizy- reakcja PCR
Po izolacji uzyskuje się bardzo małe ilości DNA, niewystarczającego do przeprowadzenia dalszej reakcji. Dlatego na tym etapie wykorzystuje się reakcję PCR, które pozwala zwielokrotnić uzyskane w izolacji DNA. Reakcja PCR zrewolucjonizowała diagnostykę genetyczną. Zasada reakcji PCR opiera się na wielokrotnym ogrzaniu i oziębieniu próbki DNA, do której dodaje się organiczne związki chemiczne, primery (startery, które rozpoznają fragmenty DNA) oraz enzym – polimerazę DNA. Cały proces prowadzony jest w urządzeniu nazywanym termocyklerem.
Trzeci etap badania- sekwencjonowanie
Sekwencjonowanie polega na ustaleniu kolejności par zasad w wybranych regionach DNA. Proces ten jest całkowicie zautomatyzowany wymaga jedynie wysokiej klasy aparatury (sekwenatorów) oraz namnożonego DNA. W wyniku tego procesu uzyskuje się profile genetyczne danych osób.
Każdy z nas posiada swój unikatowy profil genetyczny, który dość często nazywany jest „genetycznym odciskiem palca”.
Czwarty etap- analiza statystyczna
Na końcu badania ojcostwa wykonuje się analizę statystyczną porównywanych ze sobą profilów genetycznych. Wykorzystuje się w tym celu specjalny program komputerowy dokonujący analizy prawdopodobieństwa. Ostatecznie laboratorium uzyskuje jednoznaczny wynik badania ojcostwa – potwierdzenie ojcostwa z prawdopodobieństwem 99,999% lub też jego wykluczenie ze 100% pewnością.
Autor:Barbara Prokurat
testDNA Laboratorium Sp. z o.o.
Ustalenie ojcostwa
